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正确对待他们!– 存储和使用抗体的最佳实践

抗体的不正确管理和储存可能对其性能产生重大影响。本文讨论了一些存储和使用抗体的最佳实践,以便在您的实验中充分利用它们。

太热而无法处理?

在储存抗体时,您应始终参考产品特定数据表并遵循制造商的说明,因为任何抗体都必须在正确的温度下储存。不这样做可能会导致性能下降并使任何制造商的保证失效。不同温度下的稳定性很大程度上取决于抗体的形式和配方。 

抗体也可能有多个推荐的储存温度,具体取决于您希望储存的时间长度。例如,我们大多数抗体的标签和数据表都将“+4ºC 或 -20 ºC(如果首选)”作为推荐的储存条件。这是因为大多数抗体可以在 +4ºC 下保存很短的时间,通常是几周,但应该在 -20ºC 下长期保存。

提供的冻干抗体在冻干时和复溶后可能有不同的推荐储存条件。如果您使用的是冻干抗体,请查看数据表,了解重构前后推荐的储存条件。

一些抗体只有一种推荐的储存温度。例如,不含任何抗微生物剂(如叠氮化钠或硫柳汞)的抗体只能冷冻(通常为 -70ºC 或更低)储存,以减少微生物生长的可能性。  

血清和腹水应冷冻保存,因为它们含有可以降解蛋白质(包括抗体)的蛋白酶。冷冻储存有助于最大限度地降低蛋白酶活性并防止抗体在储存过程中降解。

相反,酶偶联抗体,例如 HRP 偶联抗体,通常不应冷冻。冷冻和解冻这些抗体会降低酶的催化活性,从而在与底物一起孵育时导致信号减弱。

分而治之

与冷冻和解冻相关的温度波动会导致抗体变性和聚集,从而削弱其与其靶标结合的能力。为了减少冻融循环的次数,应按照制造商的说明对抗体进行分装和储存。此外,抗体应始终储存在低温冰箱或冰柜的后部,因为与前部或门相比,该区域受温度波动的影响较小。您还应该避免将等分试样存放在无霜冰箱中,因为它们会经历温度波动的循环,以避免结冰。

理想情况下,每个等分试样应包含实验中使用的抗体体积,因此不需要重新冷冻。但是,小体积对浓度波动和蒸发更敏感,因此建议体积至少应为 10 μl。

当以高浓度储存时,抗体不太可能降解或与血管壁结合。因此,不建议在分装前稀释抗体。

当等分与荧光团或酶结合的抗体时,保护它们免受光照很重要。暴露在光线下可能会导致荧光团光漂白或破坏与抗体结合的酶的结构。这将阻碍抗体产生信号的能力。

保持干净

重要的是不要让任何可能降低其性能的物质污染您的抗体。为避免污染抗体,最好在无菌条件下移取抗体并分装抗体——以减少从同一管中移取的次数。

只取你需要的东西

解冻抗体时,只取出实验所需数量的等分试样,然后在冰上缓慢解冻。温度的剧烈波动,例如加热您手中的小瓶,可能会导致抗体不稳定。

如果您需要为同一实验解冻多个等分试样,请确保使用经过相同数量冻融循环的等分试样,并将所有等分试样的内容物汇集在一起,以确保您使用的是均质的抗体溶液。

在可能的情况下,避免重新冷冻已解冻的抗体也很重要。额外的冻融循环可能会损坏抗体的构象并降低其与其靶标结合的能力。如果您确实发现您为实验解冻的等分试样中残留了抗体,如果要在接下来的几周内使用,最好将它们保存在冰箱中,或者丢弃它们。

解冻

最后,在进行实验时,将所有抗体保存在冰箱或冰上解冻,直到准备好使用它们,这一点很重要。这有助于保持抗体的构象和抗体与其靶标结合的能力。

我们希望通过遵循这些简单的提示,您将能够充分利用您在检测中使用的任何抗体。与往常一样,我们祝愿您的研究一切顺利。


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